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Nom de l'information: | Le fléau du pays est élevé à l'aflatoxine colonne d'immuno-affinité de l'aflatoxine dédié petit |
Publié: | 2014-10-29 |
Validité: | 90 |
Caractéristiques: | état atteint chromatographie |
Quantité: | 1.00 |
Description Prix: | |
Description détaillée du produit: | état atteint colonne d'immuno-aflatoxine dédié petit aflatoxine dans les aliments B1, B2, G1, G2, M1 et M2 détection 1. Brève introduction: Cette méthode est utilisée purification sur colonne d'immuno-affinité, la chromatographie liquide à haute performance avec détection par fluorescence L'aflatoxine B1, B2, G1, G2, M1 et M2, cette méthode est applicable aux noix et similaires, fruits secs, céréales, épices, thé, café, cacao et d'autres ingrédients alimentaires et des aliments. Soluble dans le réactif organique polaire aflatoxine, si l'utilisation d'un extrait méthanol / eau matrice de l'aflatoxine uniforme obtenu en secouant ou en dispersion pour haute teneur en gras / teneur en huile de la matrice de l'échantillon doit être ajouté à n-hexane à écrémé. Ensuite, filtré et dilué dans du PBS. Mais pour l'alimentation, les condiments, le thé, le café, le cacao, etc., sans solution de Tween est diluée avec du PBS et ensuite filtré à travers un papier filtre en fibre de verre, puis par HPLC dérivatisation post-colonne détecteur de fluorescence photochimique. 2, les instruments de l'étape d'extraction, les réactifs nécessaires, solvants aflatoxine immunoaffinité de la série de colonne: immunoaffinité série de colonnes (1 ml, 25 / bo?te, 3 ml, 15 / bo?te); appareils HPLC: Agilent série 1200 contient pompe, dégazeur en ligne, échantillonneur automatique, détecteur de fluorescence, four à colonne, réacteur photochimique: bague de réaction du réacteur photochimique et l'autre à la lumière UV; Colonne: XB-C18 5 um, 250 x 4,6 mm; pré-colonne: C18 4 x 2 mm; homogénéisateur; oscillateur horizontal; triturateur, papier, d'entonnoir; erlenmeyer de 100 ml, filtre de fibres de verre; SPE adaptateur et un injecteur de capacité de 50 ml de seringues jetables de SPE Adapter10 ; balance analytique (précision 0,02 g); 1,8 ml flacon échantillonneur automatique; pipette; dispositif SPE avec un système d'aspiration: SPE aflatoxines de périphériques B1, B2, G1, G2, M1, M2 standard ou mixte doivent mesurer unique norme; Tween 20; solution de tampon PBS: 1,16 g Na2HPO4 / 0,20 g KH2PO4 / 8 g NaCl / 0,2 g KCl dissous dans l'eau de 900 ml, avec HCL ou NaOH pour ajuster le pH à 7,4, puis régler le volume à 1000 ml; phosphate, phosphate disodique dihydrogénophosphate de potassium, chlorure de potassium, chlorure de sodium, de l'eau désionisée; methanol, AR; methanol, de qualité HPLC; l'acétonitrile, de qualité HPLC; n-hexane, AR; solution d'extraction: 80/20 en volume de methanol et d'eau, par boue comme le méthanol pur (AR) en tant que le solvant d'extraction seul; CLHP éluant A: eau. Eluant B: méthanol / acétonitrile 80/20 (v / v). solution de Tween Tween 100ml 20 dissous dans 900 ml de solution étalon de HPLC de l'eau: la solution standard baptisé contenu cible 1ug / kg de calibrage étape de traitement de la solution avant l'extraction de graines d'arachide de produits similaires (pistaches, amandes, coquilles d'amande , arachides et autres): Peser 50g sirupeuse (adhésion homogène 100-300% d'eau) a été ajouté 5gNaCl (pour les échantillons enrichis ajoutés à une dispersion de solution standard), ajouter 75 ml de méthanol pur est ensuite homogénéisé trois minutes extrait de choc 30 minutes. Pour une petite quantité de l'échantillon, ledit échantillon 25g sécher uniformément, et 100 ml de methanol, on ajoute 5 g de NaCl / 80/20 (v / v) d'une solution aqueuse de 3 minutes, puis on homogénéise pendant 30 minutes afin d'extraire ou de vibrations. L'extrait a été filtré avec un papier filtre ou centrifugation, le surnageant a été transféré dans 100 ml Erlenmeyer de. Pour le beurre d'arachide spécial ou autre beurre de noix, la couche extérieure de matière grasse, il est difficile à extraire. Ledit échantillon de 25 g a été ajouté 5 g de NaCl, 100 ml et 50 ml d'une solution de n-hexane extrait. Extrait avec un homogénéiseur pendant 3 à 5 minutes, la portion de la phase huileuse serait soluble dans l'hexane, le liquide surnageant a été recueilli par filtration. Peser 25 g de céréales de type lait échantillon dans la fiole conique de 250 ml, 5 g de NaCl, 100 ml de solution d'extraction (pour une solution standard échantillons dopés ont été ajoutés à une dispersion), puis agité à 150 rpm sur un agitateur horizontal pendant 30 minutes. Pour les échantillons de lait peut être pesé et ajouté à l'extrait dissous 2-5g, tel que médiocrement soluble peut être convenablement chauffé et filtré à travers un papier filtre pour recueillir le surnageant. épices, thé, café, cacao, aliments pour animaux, les produits pharmaceutiques, l'extrait de capsicum échantillon sec pesé 20g, 50g échantillon de boue, en ajoutant 5 g de NaCl, la solution d'extraction de 100 ml, suspension, comme Ajouter 80 ml de méthanol pur (standard pour les échantillons enrichis ajouté à une dispersion solution), puis on a agité à 150 rpm sur un agitateur horizontal pendant 30 minutes. Filtre papier pour recueillir le surnageant. Le filtrat a été ajouté 20 ml de solution de 5 ml de Tween est dilué, la dilution avec un filtre en fibre de verre. Valeur du blanc réactif témoin doit être constitué. purification colonne d'immuno-affinité (IAC) de la colonne d'immuno-affinité est placé sur un dispositif d'extraction en phase solide, un échantillon correspondant à la seconde colonne; colonne une solution de PBS 10 ml activée, le débit est maintenu à 2 - 3 ml / min, pour assurer que l'échantillon avant la colonne réservée petite quantité (0,5 ml) de solution de PBS, la solution d'activation ne sont pas collectées; 1, extrait d'arachide, le lait, les noix et les grains analogues: extrait de 3,1 ml a été 9.9mlPBS dilution. Par dilution avec 12.6ml IAC, mais ne peut pas dépasser le taux de 5 ml / min. Avec environ 20 ml d'eau désionisée piliers de rin?age à l'eau, qui ne doit pas dépasser le taux de 10 ml 5 ml / min, vide 1 minute; 2, les épices, le thé, le café, le cacao, les aliments, les produits pharmaceutiques, extrait de piment: 9 ml d'échantillon dilué par la vaccination colonne d'affinité à un débit de pas plus de 5 ml / min. Avec environ 20 ml d'eau désionisée de rin?age de la colonne, le débit ne doit pas dépasser 10 ml, dans lequel 5 ml / min, sous vide 1 minute; éluée avec 1,5 ml de methanol; (la colonne a été relié à un appareil en verre avec 0,75 ml de methanol à deux reprises à la cible Le éluée et recueillie dans un tube de 15 ml par centrifugation, la pression initiale dans la colonne de sorte qu'il est probablement par quatre gouttes de gouttelettes de liquide, puis on laisse couler naturellement vers le bas par gravité, et enfin passer dans l'air de telle sorte que tout le liquide sort et recueilli.) Eluant dilué et mélangé avec 1,5 ml d'eau, le volume final de 3 ml; après le test de la machine de filtration Note: L'utilisation spécifique de la colonne d'immuno-vous aux instructions 3. chromatographie liquide - fluorescence Système de mesure instrument de LC: Agilent 1200 deux yuans Agilent 1200 à haute pression sous vide de la pompe dégazeur Agilent 1200 Agilent dispositif de thermostat de l'échantillonneur automatique XB-C18 250mm x 4.6 mm 5um flux après 1200 colonne four photochimique colonne phase de dérivation: Volume d'injection: C18 ,, 4 x52μmmm (acétonitrile: méthanol ( 50:50)): eau = 35: température de 65 20 ul colonne: FLD: 1 ml / min à 35 ° C excitation: 365 nm; émission: chromatographie Guoda de 450 nm Mall Adresse: Tongbai Road, district de Zhongyuan n ° 98 Royal Lake Zone A Royal Lake Garden Palace Salle 811, batiment 3103 Guoda chromatographie Mall Tél: 0371-68850806 / 68850808 Guoda chromatographie Mall Fax: 0371-68811223 / 68811229 Guoda chromatographie Mall: Guoda instrument de chromatographie Mall www.gd226.cn Guoda Chromatographie Mall www.guodasepu.com Guoda chromatographie Mall mail: 2350470569@qq.com Guoda gratuit 400 Téléphone: 400-11-58566 Guoda chromatographie Mall en ligne QQ Service à la clientèle: 2350470569 |
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